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β-木糖苷酶检测试剂盒说明书!

阅读次数:698    资料下载    发布时间:2018/3/20 15:31:22

β-木糖苷酶检测试剂盒说明书!

规格:50 管/24 样

产品内容:
提取液:液体50mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体2mL×1 瓶,4℃避光保存。
试剂二:液体35mL×1 瓶,4℃保存。
试剂三:液体35mL×1 瓶,4℃保存。
标准液:液体1ml×1支,4℃保存,10mol/ml对硝基苯酚溶液。

产品说明:
β-木糖苷酶(EC3.2.1.37)存在于植物、细菌和真菌等生物体,是催化木聚糖类半纤维素降解的关键酶,产物木糖可作为碳源应用于微生物发酵。另外,β-木糖苷酶还可以作为生物漂白剂应用于造纸工业,比传统的漂白法环保,具有广泛的应用价值。
β-木糖苷酶催化对硝基苯酚-β-D-木糖苷产生对硝基苯酚,对硝基苯酚在405nm 处有特征吸收峰,测定405nm 光吸收增加速率,可计算β-木糖苷酶活性。

自备实验用品及仪器
天平、低温离心机、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿和蒸馏水。

操作步骤:
一、粗酶液提取
1. 植物样本:称取约0.1g 样品,加1.0 mL 提取液充分冰浴匀浆,然后12000rpm,4℃,离心20min,弃沉淀,取20μL 上清测定蛋白含量,剩余上清作为待测酶液。

2. 细菌、真菌样本:收集约500 万个细胞,加入1.0 mL 提取液,超声波破碎(冰浴,功率300w,
超声3 秒,间隔7 秒,总时间3min);然后10000rpm,4℃,离心10min,弃沉淀,取20μL 上清测定蛋白含量,剩余上清置于冰上待测。

3. 标准液的处理:用试剂二将标准液稀释至0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125、0.00625、0 mol/ml。

注意事项:
1、吸光度变化应该控制在0.05-0.6 之间。否则加大样品量或稀释样品,注意计算公式中参与计算的稀释倍数要相应改变。

2、样品蛋白质含量需要另外测定,可选用考马斯亮蓝法蛋白含量测定试剂盒进行测定。


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