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Altmann法的线粒体染色实验方法

阅读次数:4166    发布时间:2019/5/17 10:31:18

    线粒体是细胞能量的来源,其形态可以有较大的变化(从杆状到圆形)。线粒体体积很小,只有借助电子显微镜才能观察到。线粒体包含遗传性母体 DNA。其数量、大小和形状根据动物细胞类型而有差异。观察线粒体的*佳方式是用电子显微镜,组织病理学方法如 Altmann 技术是有帮助的。用组织化学方法成功显示线粒体取决于以下几个因素:组织必须新鲜固定,切片薄(2~3μm)。由于当细胞缺氧或死亡后线粒体是发生退行性变*早的细胞器,快速固定至关重要。
   线粒体染色以 Champy-Kull 方法结果,但是染色技术较复杂,Heidenhain 铁苏木素方法需要精确分化。Altmann 品红方法较简单,但也应注意控制分化的程度。
操作步骤:   
 1. 组织固定,推荐使用 Champy 固定液,但 Helly 固定液效果也较好。
2. 切片脱蜡至水。
3. 将切片浸泡于 Aniline 品红染色液, 稍微加热切片至有热气出现,放置 5min。
4. 自来水冲洗切片。
5. 用 Aniline 分化液 A 分化至过染的红色褪去。
6. 用 Aniline 分化液 B 分化,应显微镜下控制染色程度。
7. 无水乙醇快速脱水 2 次。
8. 二甲苯透明,非水溶性封片剂封片。

注意事项:
1. 应仔细分化,以使背景呈黄色。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

   信帆生物拥有一支在试剂研发、抗体研究、生产及质量管理方面具有丰富经验的高素质人才队伍。环境优美、整洁,从细胞培养、蛋白纯化、疫苗配制到小容量注射剂、分装及锅炉、空调、制水全套生产线。检验仪器均采用国内外设备。的厂房设施、精良的仪器设备,从而确保了产品的质量和检测的快速、准确、方便,在同行业中一直名列前茅。        
   
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